在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，培養(yǎng)基上清廢液真空吸引裝置是重要的工具。這類裝置直接接觸培養(yǎng)環(huán)境，其滅菌效果直接關(guān)系到細(xì)胞培養(yǎng)的成敗——沒有有效消毒可能引入微生物污染，導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)失敗，造成時(shí)間與資源上的重大損失13。因此，建立科學(xué)、系統(tǒng)的滅菌流程至關(guān)重要。

一、培養(yǎng)基廢液抽吸泵日程關(guān)鍵防污染措施

1.高溫高壓滅菌：這是最主要和常見的方式，能夠有效殺滅細(xì)菌、真菌及其孢子。

2.防菌滯留：向瓶內(nèi)吸入少量稀釋消毒液，如0. 1%次氯酸鈉，廢液抽吸后，可抑制收集期內(nèi)微生物繁殖。

3.吸頭適配器與一次性耗材：單道、8道吸頭適配器，每次使用后應(yīng)滅菌，防止交叉污染。需要特別注意的是，吸頭適配器并非直接用于吸液，一般需要插上一次性Tip槍頭。

二、裝置結(jié)構(gòu)與分區(qū)滅菌策略

       在了解上述常用的防污染措施后，我們再來詳細(xì)介紹設(shè)備不同組成部分所對應(yīng)的不同消毒滅菌方法。由于廢液真空吸引裝置通常由主機(jī)機(jī)體與液體接觸附件（集液瓶、吸頭適配器、吸液管等）兩大部分構(gòu)成，不同部分的材質(zhì)、結(jié)構(gòu)與功能差異決定了滅菌方法的區(qū)別。

1. 主機(jī)機(jī)體

       主機(jī)雖然不直接接觸培養(yǎng)液，但作為整體系統(tǒng)的一部分，其表面消毒也很重要，否則可能會影響細(xì)胞房環(huán)境。常見的滅菌方式包括：

1）75%酒精擦拭：實(shí)驗(yàn)前后使用無菌布浸潤酒精全面擦拭機(jī)體表面，尤其注意按鈕、接口等易忽略部位。

2）紫外燈照射：在細(xì)胞房整體紫外消毒時(shí)，設(shè)備外殼可耐受紫外照射，無老化褪色風(fēng)險(xiǎn)。

         專門用于抽吸培養(yǎng)基上清廢液的產(chǎn)品在設(shè)計(jì)時(shí)也會考慮到這方面，如BSUD-S204P4A型號采用全不銹鋼外殼，表面光滑，便于清潔和滅菌，同時(shí)不銹鋼材料長久受紫外照射也不會有所影響，普通塑料材質(zhì)長期照射易脆化開裂。再比如全新款的BV300EP2實(shí)驗(yàn)室2升臺式吸液泵的外殼為全密閉，正面沒有散熱孔，便于噴灑酒精。

2. 液體接觸附件（廢液瓶、管路及吸頭適配器）

        這些部件直接接觸廢液，是污染防控的核心，需采用更強(qiáng)效的滅菌方式，主要包括：

1）高溫高壓滅菌法：

將廢液收集瓶（PP聚丙烯材質(zhì)）、泵管、手持操作器（POM聚甲醛材質(zhì)）、吸頭適配器等拆卸后，置于高壓滅菌鍋內(nèi)121°C條件下滅菌30分鐘，能殺滅細(xì)菌、真菌及其孢子。需要注意的是滅菌后必須烘干，避免殘留水分被吸入主機(jī)導(dǎo)致設(shè)備損壞。

2）化學(xué)消毒液浸泡法：

日常連續(xù)使用期間，無法每次抽取后立即高壓滅菌。推薦使用含氯消毒液，如次氯酸鈉適當(dāng)稀釋液，能有效抑制瓶內(nèi)及管路中微生物滋生。這里需要注意的是消毒液浸泡后必須用清水沖洗，避免化學(xué)殘留腐蝕部件或影響后續(xù)細(xì)胞操作。此外廢液瓶材質(zhì)需要能夠耐受含氯的消毒液，如使用PP聚丙烯材質(zhì)制作廢液瓶的BV300AP2和聚砜類材質(zhì)制作廢液瓶的BV300EP，都可以使用這種防止長菌的方法。

三、操作流程規(guī)范與常見錯誤規(guī)避

為確保滅菌有效且設(shè)備安全，需建立嚴(yán)格的操作規(guī)范，下面是一些常見的注意事項(xiàng)：

●滅菌后組裝：部件烘干后再連接，濕態(tài)組裝導(dǎo)致主機(jī)電路短路。

●廢液處理：121°C高壓滅菌30分鐘再丟棄，直接傾倒污染環(huán)境。

●管路清潔：如使用次氯酸鈉浸泡，滅菌前，需要用清水充分沖洗各部件，消毒液殘留腐蝕部件。

●設(shè)備存放：置于潔凈、干燥環(huán)境，有條件的可以遮蓋防塵，隨意放置致二次污染。

●避免使用非實(shí)驗(yàn)室專用的吸液設(shè)備，如醫(yī)用或民用吸液裝置，其材質(zhì)可能無法耐受高溫高壓或消毒液。

●除不銹鋼和鋁合金機(jī)體型號外，紫外消毒時(shí)主機(jī)需暴露于照射范圍，勿用普通塑料罩覆蓋。

四、總結(jié)

培養(yǎng)基廢液吸取裝置的滅菌管理是一項(xiàng)系統(tǒng)性工程，需結(jié)合設(shè)備材質(zhì)特性、使用頻率及實(shí)驗(yàn)室條件，綜合運(yùn)用物理滅菌（高溫高壓、紫外）與化學(xué)消毒（酒精、含氯制劑）手段。尤其重視直接接觸廢液的附件滅菌，并養(yǎng)成“操作前檢查，操作中防護(hù)，操作后處理"的習(xí)慣。唯有將嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臏缇绦騼?nèi)化為實(shí)驗(yàn)規(guī)范，才能為細(xì)胞培養(yǎng)筑起可靠的“無菌防線"，確?？蒲薪Y(jié)果的準(zhǔn)確性與可重復(fù)性。